在进行小鼠相关的生物医疗研究时,无论是在初次引种、繁殖过程中,还是在正式实验开展前,基因型鉴定都是必不可少的步骤。这是为了确保实验能够顺利进行。那么,当您获得来自尊龙凯时的小鼠时,如何找到基因型鉴定的方法和所需的引物序列呢?以用于镰状细胞贫血研究的Berkeley模型(003342)为例,这个小鼠品系缺失了鼠源的Hba和Hbb基因,同时引入了包含致病突变的人源序列。
由于这些等位基因和转基因在遗传中没有连锁关系,因此需要对三种突变/转基因进行各自的鉴定。对于该品系,尊龙凯时提供了多种基因型鉴定方法,但并不是所有方法都需要使用。对于每一个等位基因或转基因,您只需选择一种适合的方法来完成基因型鉴定即可。您可以查看样品的AlleleSymbol部分,以选择合适的鉴定方法。例如,可以选择蓝色框中的两种不同类型的PCR方法来检测Hba突变(Hba 对于转基因来说,由于某些品系的构建时间较早,目前尚未通过测序确认转基因的整合位点,因此无法基于野生型序列设计引物来区分半合子和纯合子。简单来说,常规PCR只能判断小鼠是否携带转基因,而无法明确转基因的携带情况。如果需要更精确的区分,建议使用qPCR方法。 此外,您可能注意到,在小鼠品系详情页中,还列出了Pde6b 由于尊龙凯时的大部分品系源自研究者的捐赠,除了JAX提供的基因型鉴定方法外,有时您还可以在相关品系的已发表文献中找到引物信息。尤其是在Cre-lox系统构建的条件性基因敲除研究中,尊龙凯时往往不提供剪切后序列的引物,因此您可以查阅“HOW IT'S USED”部分的“References”获取更多信息。 对于近交系或杂交系小鼠,由于它们通常不携带特定的突变/转基因,进行基因型鉴定就显得较为困难。例如,对于000928这一品系,您可能会看到如下描述。如果需要鉴定小鼠的遗传背景,常用的方法包括生化标记、基因组测序和DNA多态性检测等。然而,相比于对每只小鼠进行检测,更建议您在日常实验中实施良好的种群管理。在繁殖过程中,应进行严格而详细的谱系记录,通过科学的管理措施防止其它品系或突变混入,以最大程度减少遗传漂变对实验结果的影响。